|
广西水产科技
2001年第2期(总第98期)
巴西鲷人工繁殖技术
唐章生
余晓丽
卢智发
曾令方
(广西水产研究所
南宁
530021)
提
要
在广西南宁对巴西鲷进行人工繁殖,
2000年4月~6月共催产亲鱼4批次 共249尾,雄145尾,雌104尾,产卵730万粒,平均受精率76.5%,获得苗454万尾,孵化率6
8%。另外对巴西鲷胚胎发育进行了连续观察和显微照相,记录各种时序及其特征。初步了解了巴西鲷在人工繁殖条件下胚胎发育的基本规律。
关键词
巴西鲷
人工繁殖
胚胎发育
巴西鲷学名小口脂鲤(
Prochilodus scrofa ),又称南美鲱鱼,原产于巴西南部的巴拉那河水系,是巴西国内的主要淡水经济鱼类,该鱼于1996年由浙江省淡水水产研究所首先引进我国,并于1998年6月人工繁殖成功,获得少量种苗。广西水产研究所1998年引进苗种,经2年池塘养殖及亲鱼培育,于2000年进行人工繁殖并获成功。
1.材料与方法
(1)亲鱼选择及培育
广西水产研究所1998年7月22日引进体长2~3cm/尾巴西鲷夏花鱼种1000尾,放养于那马基地鱼塘与虾混养,在11月14日90多d后干塘捕虾,共获559尾巴西鲷,平均体重0.35kg/尾
,最大个体0.5kg/尾,之后移至5#塘继续培养过冬,经1999年精心饲养之后,挑选亲鱼在塘中自然过冬,每天做水温记录,定时加水保持一定水位以确保亲鱼顺利过冬,2000年春季来临,水温回升,开始日常投喂,降低水位让亲鱼接受光照,冲水每次2h,每天1次,刺激亲鱼的性腺发育,不定期检查亲鱼性腺成熟程度。2000年3月捕捞检查,共选择亲鱼321尾,平均体重1.3kg,最大个体1.8kg。
(2)成熟个体的选择
在广西南宁4月底5月上旬,水温25~27℃就可进行催产亲鱼的选择。雄鱼一般个体较雌鱼小,体表顺逆触抚有刺手感,尤其在臂鳍基部两侧上方粗糙明显,泄殖孔凹陷、较小、有2个孔,腹部不膨大,轻压腹部有乳白色的精液流出或呈线状精点。雌鱼个体较雄鱼大,体表稍粗糙,泄殖孔凸出,腹部膨大不明显,有3个孔,泄殖孔较大呈圆形、红润、成熟的亲鱼可以挤出散开的卵粒,卵粒青灰色或浅黄色,光泽度好。
挑选亲鱼的同时,给部分未成熟的雌亲鱼打催熟针,注射剂量0.3靏LRH-A2/kg,并将放回亲鱼塘继续培育。
(3)人工催产
①仔细挑选适用的成熟良好的亲鱼,雌雄比1∶1.5或1∶2,用亲鱼夹搬运移入催产池中的暂养箱中,雌雄分开。一般对成熟度好的亲鱼实行一次注射方式进行催产。在水温25~27℃时,18∶00~23∶00注射,次日清晨可产卵。雄鱼剂量为雌鱼的50%,催产剂采用体腔注射,从胸鳍基部无磷凹陷处入针成45°角,进针0.3~0.5cm深,一般每尾鱼以1~3ml为宜
。根据2000年4月29日进行第1批8组亲鱼的催产试验设计,最后挑选出效果好的地欧酮和促
黄体释放激素混和液,实行一次注射方式进行。
②产卵。水温26~28℃,将注射催产剂后的亲鱼放入同一产卵池,连续冲水呈微流状态,达效应时间12~16h后,常常见到雌鱼被几尾雄亲鱼紧紧追逐,摩擦雌鱼腹部,雄鱼发出哈哈声,将头部顶撞雌鱼,甚至将雌鱼抬出水面,有时,雌、雄鱼急速运动身体,或腹部靠近尾部弯曲,扭在一起,颤抖着胸、腹鳍产卵、排精,开始出现自然交配受精,产出的受精卵呈漂浮性。采取体积法用碗过数,再乘以单位容器卵数即得产卵量。
③产后亲鱼护理:把产后亲鱼搬出产卵池时,对受伤亲鱼用金霉素软膏涂擦伤口,预防水霉及溃烂。同时给每尾亲鱼注射1.5~2ml康复剂〔生理盐水50ml,葡萄糖100ml,氯霉素
10ml(25万单位/25ml)〕,放入产后亲鱼培育池,进行精心饲养管理。
(4)孵化
本试验把集卵箱中的卵直接放入孵化环道中孵化,在水温26~27℃,溶氧6.9mg/l,pH
值8.2~8.6,流速0.23m/s。鱼苗13h35min出膜,出膜时胚体长为4.46mm,待卵黄囊消失能平游时需60~72h,鱼苗见腰点(平均全长5.99mm,平均体重为0.22mg)及时转塘进行塘育
。
(5)巴西鲷胚胎发育
用16×160/0.17电光双筒解剖镜连续观察胚胎发育,记录各时序及其特征,采用日产
解
剖镜带摄相机连续观察胚胎发育的全过程,对具有特征时序的胚胎进行拍照。用游标目卡尺测卵径和胚长。
2.结果
(1)在广西成功地进行了巴西鲷人工繁殖,形成了一定的生产规模。在2000年4~6月
共催产亲鱼4批次,雄145尾,雌104尾,另解剖一尾体长35cm,体重900g雌鱼,检查怀卵数1.74×105粒。总收卵数730万粒,平均受精率76.5%,获得苗454万尾,孵化率68%,详见表
1。
表1
人工繁殖巴西鲷鱼苗情况表
| 催产批次 |
催产时间(月.日) |
亲鱼数(尾) |
产卵量(万粒) |
受精率(%) |
出苗量(万尾) |
孵化率(%) |
| ♀ |
♂ |
| 1 |
4.29 |
8 |
8 |
25 |
75.4 |
5 |
26.5 |
| 2 |
5.4 |
31 |
64 |
250 |
73.5 |
150 |
81.6 |
| 3 |
5.19 |
46 |
57 |
350 |
80.5 |
234 |
83.1 |
| 4 |
6.13 |
19 |
16 |
105 |
76.5 |
65 |
80.9 |
| 合计 |
|
104 |
145 |
730 |
76.5 |
454 |
68.0 |
(2)巴西鲷鱼的胚胎发育:项目组成员对巴西鲷胚胎发育进行了连续观察和显微照相,
记
录各时序及其特征。成熟的巴西鲷卵为圆球形、呈黄褐色、属于漂浮性卵,无粘性,卵径为1.40~1.50mm,巴西鲷胚胎发育速度快,受精卵在水温26~27℃条件下,出膜时间为13h
35min。初步了解了巴西鲷在人工繁殖条件下胚胎发育的基本规律,并根据拍照的结果,
描绘出巴西鲷的胚胎发育时序图。详见附图及表2。
表2
巴西鲷胚胎发育特征和速度(水温26~27℃)
| 分
期 |
外
部
特
征
|
经历时间
|
| 图序 |
名称 |
| 1 |
受精卵
|
1圆球形、卵质均匀分布。
|
0∶0
|
| 2 |
1细胞期
|
原生质集中在卵球一极形成隆起的胚盘。
|
0∶25分
|
| 3 |
2细胞期 |
胚盘经分裂为两个大小相等的细胞。 |
0∶34分
|
| 4 |
4细胞期 |
分裂球再次经裂,分裂沟与第1次相垂直,4个细胞大小相等。 |
0∶42分
|
| 5 |
8细胞期
|
有两个经裂面与第1次分裂面平行,8个细胞排列成两排,分裂
球的体积无明显差异,中间4个略小而稍高,颜色较深。
|
0∶51分
|
| 6 |
16细胞期 |
两个经裂面与第2次分裂面平行,16个细胞死,此16个细胞体积上
稍有差异,内源物渐少。 |
1∶05分
|
| 7 |
多细胞期 |
有4个经裂面与第3次分裂面平行,32个细胞成4行排列在同一平面
,
仍分经裂,但各分裂球分裂的速度不甚一致,大小不十分整齐的64个细胞,细胞继续分裂,
体积变小界线不清。 |
1∶28分
|
| 8 |
囊胚早期
|
由很多分裂球组成本胚层,高突在卵黄上。
|
1∶55分
|
| 9 |
囊胚晚期 |
细胞继续分裂,并开始产生下包作用,细胞界线完全模糊不清
,胚层高度下降至卵径的1/6左右。 |
2∶23分
|
| 10 |
原肠早期
|
胚层开始较明显的下包,胚盘类似帽状套在卵黄囊之上,下
包达卵径的1/4处。
|
2∶27分
|
| 11 |
原肠中期* |
原囊胚高度完全消失、卵黄内含物清晰,可见,下包达卵径
的3/5处,即原肠中期。 |
2∶58
|
| 12 |
原肠后期
|
胚层下包超过卵黄囊的2/3,胚层包围了大部分卵黄,胚体雏形
开始形成胚盾伸长过动物极端,并于前端开始形成略为膨大的脑泡原基,胚体的中轴器官开
始分化形成。
|
|
| 13 |
神经胚期 |
胚层包围了绝大部分卵黄,仅植物极端露出卵黄栓。 |
4∶
43
|
| 14 |
胚孔封闭期 |
胚层完全包围卵黄,胚层合拢,胚孔封闭,胚体雏形形成。 |
5∶32分
|
| 15 |
体节出现期 |
胚体稍有增长,在胚体中部偏前,开始形成肌节3-4节。 |
6
∶08分
|
| 16 |
脊索出现期 |
体节增至6-7节,头部出现眼泡原基,同时形成脑泡的分化
,脑泡在 眼泡的正上方。体节增至11-12节,在眼泡原基内出现扁豆形的眼囊。体节增至14节,在
胚体的中轴上出现脊索,体节增至17节时脊索更明显。 |
7∶59分
|
| 17 |
尾芽期 |
体节增至20-21节,尾芽从卵黄囊未端分化出来,可见一游离的
圆形尾泡,尾泡透明。
|
9∶04分
|
| 18 |
晶体形成期 |
受精后571min,在胚体前端正方出现泡状听囊原基,同时
胚体 出现全身间歇性抽动,每分钟10次,随后抽动频率逐渐增加,受精后641min,体节增至25—
26节抽动达60次/min,占胚全长2/5部
分的尾部与卵黄囊游离分开,尾部伸出鳍褶形成。受精后650min,头部、腹部下方斜角三角
形透明处出现心脏原基,有许多颗粒物质集中较密。受精后658min,眼囊内出现类似圆形无
色透明的眼泡晶体,体节增至30-31节。
|
10∶58分
|
| 19 |
心跳期
|
受精后673min,在听囊中椭圆形
的两端形成两个颜色较深,清 晰可见
的耳石,尾部抽动频率增至114次/min,而且抽动稳定。受精后697min,心脏产生微微搏动
,频率为50-54次/min,在胚体的中躯部至尾部肌肉有明显的收缩作用,使得胚体和卵黄囊
在卵膜内整体扭动,体节为34节(见图19)。 |
11∶37
|
| 20 |
出膜期
|
受精后713min,胚体可见心脏及卵黄腹部有无色的液体循环,
胚体扭动加剧,高达151次/min、心率加快到75-79次/min,受精后720min,在眼晶体外圈开
始出现黑色素,
首先呈较细的圆圈,黑色素较稀,随后黑圈渐渐变粗,黑色素较密,最后使整个眼弥散黑色
素。受精后752min,血黄素出现,可见黄色血球在循环,在头部的腹下与卵黄囊端上方之间
4对鳃弓可见,在卵黄囊上许多血管清晰可见,肠道较明显,肛门开口处有较明显外凸,全
身抽动剧烈,体节增至37-38节。
受精后775min,胚体中后腹面的鳍褶出现断裂,形成肛门。眼后下面形成6色透明的三
角形鳃盖,透过鳃盖可观察到内部的鳃弓,此时体节为41-43节。
受精后790min,胸鳍原基形成,类似月牙形,受精后803min,进入孵化期。体节增
至45- 47节,全身抽动频率达180次/min。心跳115次/min,头部接触卵膜,胚体在膜内狂窜。卵膜
弹
性及光泽明显下降,卵膜愈来愈薄,有利于胚体头部先出膜13∶23
带出卵黄囊及胚体,完成整体孵
化过程(见图20)。出膜仔鱼体全长为4.46mm。本阶段持续12min左右。
|
|
*计算受精率。
3.讨论
(1)巴西鲷从出膜至性成熟,在广西南宁需22个月时间。成熟个体一般在600g以上,雌
鱼比雄鱼重,巴西鲷怀卵量较大,每公斤的亲鱼怀卵18~25万粒。注射催产剂可诱导亲鱼
在产卵池自然产卵受精,卵漂浮性,吸水后平均卵径为2.28mm,最大外膜直径3.94mm。
(2)在水温26~27℃条件下,巴西鲷孵化时数为815min(即13h35min)。相同水温条件下
,同为脂鲤属的淡水白鲳孵化时数为21h58min〔1〕,巴西鲷孵化时数比淡水白鲳少8
h2 3min。在水温27℃条件时,草鱼、鲢鱼孵化时数分别为23∶00、28∶15〔2〕,都比
巴西鲷孵化时数大。鱼类胚胎发育速度主要受遗传因素和水温等环境因素的影响。在本次试
验中水温26~27℃,溶氧6.9mg/l,pH值8.2~8.6,流速0.23m/s,说明环境条件适宜〔
3〕,根据对巴西鲷鱼苗培育结果,已证明仔鱼的生长发育正常,所以巴西鲷该胚胎发育
速度反映其遗传特征。
(3)本次试验孵化用水的pH值为8.2~8.6,此用水碱度偏高是否对巴西鲷胚胎发育有影响尚待研究。
(4)作者观察到在本试验条件下的胚胎畸形,若在孵化温度为28℃以上时畸形率更高。笔者认为在生产中孵化巴西鲷温度应控制在28℃以下,最佳孵化温度为25~27℃。
参考文献
[1]张中英等淡水白鲳的生物学和人工繁殖研究淡水渔业,1991(4):3-6
[2]刘建康主编中国淡水鱼养殖学北京:科学出版社1992
[3]雷慧僧等池塘养鱼学北京:科学出版社1981
|