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电子报刊

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   广西水产科技

  2001年第2期(总第98期)


巴西鲷人工繁殖技术

唐章生    余晓丽   卢智发    曾令方
(广西水产研究所   南宁   530021)

       在广西南宁对巴西鲷进行人工繁殖, 2000年4月~6月共催产亲鱼4批次 共249尾,雄145尾,雌104尾,产卵730万粒,平均受精率765%,获得苗454万尾,孵化率6 8%。另外对巴西鲷胚胎发育进行了连续观察和显微照相,记录各种时序及其特征。初步了解了巴西鲷在人工繁殖条件下胚胎发育的基本规律。       
     关键词   巴西鲷   人工繁殖  胚胎发育                

      巴西鲷学名小口脂鲤( Prochilodus scrofa ),又称南美鲱鱼,原产于巴西南部的巴拉那河水系,是巴西国内的主要淡水经济鱼类,该鱼于1996年由浙江省淡水水产研究所首先引进我国,并于1998年6月人工繁殖成功,获得少量种苗。广西水产研究所1998年引进苗种,经2年池塘养殖及亲鱼培育,于2000年进行人工繁殖并获成功。

1.材料与方法      

      (1)亲鱼选择及培育
       广西水产研究所1998年7月22日引进体长2~3cm/尾巴西鲷夏花鱼种1000尾,放养于那马基地鱼塘与虾混养,在11月14日90多d后干塘捕虾,共获559尾巴西鲷,平均体重0.35kg/尾 ,最大个体0.5kg/尾,之后移至5#塘继续培养过冬,经1999年精心饲养之后,挑选亲鱼在塘中自然过冬,每天做水温记录,定时加水保持一定水位以确保亲鱼顺利过冬,2000年春季来临,水温回升,开始日常投喂,降低水位让亲鱼接受光照,冲水每次2h,每天1次,刺激亲鱼的性腺发育,不定期检查亲鱼性腺成熟程度。2000年3月捕捞检查,共选择亲鱼321尾,平均体重1.3kg,最大个体1.8kg。

      (2)成熟个体的选择
      在广西南宁4月底5月上旬,水温25~27℃就可进行催产亲鱼的选择。雄鱼一般个体较雌鱼小,体表顺逆触抚有刺手感,尤其在臂鳍基部两侧上方粗糙明显,泄殖孔凹陷、较小、有2个孔,腹部不膨大,轻压腹部有乳白色的精液流出或呈线状精点。雌鱼个体较雄鱼大,体表稍粗糙,泄殖孔凸出,腹部膨大不明显,有3个孔,泄殖孔较大呈圆形、红润、成熟的亲鱼可以挤出散开的卵粒,卵粒青灰色或浅黄色,光泽度好。
     挑选亲鱼的同时,给部分未成熟的雌亲鱼打催熟针,注射剂量0.3LRH-A2/kg,并将放回亲鱼塘继续培育。

     (3)人工催产
      ①仔细挑选适用的成熟良好的亲鱼,雌雄比1∶1.5或1∶2,用亲鱼夹搬运移入催产池中的暂养箱中,雌雄分开。一般对成熟度好的亲鱼实行一次注射方式进行催产。在水温25~27℃时,18∶00~23∶00注射,次日清晨可产卵。雄鱼剂量为雌鱼的50%,催产剂采用体腔注射,从胸鳍基部无磷凹陷处入针成45°角,进针0.3~0.5cm深,一般每尾鱼以1~3ml为宜 。根据2000年4月29日进行第1批8组亲鱼的催产试验设计,最后挑选出效果好的地欧酮和促 黄体释放激素混和液,实行一次注射方式进行。
      ②产卵。水温26~28℃,将注射催产剂后的亲鱼放入同一产卵池,连续冲水呈微流状态,达效应时间12~16h后,常常见到雌鱼被几尾雄亲鱼紧紧追逐,摩擦雌鱼腹部,雄鱼发出哈哈声,将头部顶撞雌鱼,甚至将雌鱼抬出水面,有时,雌、雄鱼急速运动身体,或腹部靠近尾部弯曲,扭在一起,颤抖着胸、腹鳍产卵、排精,开始出现自然交配受精,产出的受精卵呈漂浮性。采取体积法用碗过数,再乘以单位容器卵数即得产卵量。       
      ③产后亲鱼护理:把产后亲鱼搬出产卵池时,对受伤亲鱼用金霉素软膏涂擦伤口,预防水霉及溃烂。同时给每尾亲鱼注射1.5~2ml康复剂〔生理盐水50ml,葡萄糖100ml,氯霉素 10ml(25万单位/25ml)〕,放入产后亲鱼培育池,进行精心饲养管理。

      (4)孵化
       本试验把集卵箱中的卵直接放入孵化环道中孵化,在水温26~27℃,溶氧6.9mg/l,pH 值8.2~8.6,流速0.23m/s。鱼苗13h35min出膜,出膜时胚体长为4.46mm,待卵黄囊消失能平游时需60~72h,鱼苗见腰点(平均全长5.99mm,平均体重为0.22mg)及时转塘进行塘育 。

       (5)巴西鲷胚胎发育
       用16×160/0.17电光双筒解剖镜连续观察胚胎发育,记录各时序及其特征,采用日产 解 剖镜带摄相机连续观察胚胎发育的全过程,对具有特征时序的胚胎进行拍照。用游标目卡尺测卵径和胚长。

     2.结果      

     (1)在广西成功地进行了巴西鲷人工繁殖,形成了一定的生产规模。在2000年4~6月 共催产亲鱼4批次,雄145尾,雌104尾,另解剖一尾体长35cm,体重900g雌鱼,检查怀卵数1.74×105粒。总收卵数730万粒,平均受精率76.5%,获得苗454万尾,孵化率68%,详见表 1。

       表1                    人工繁殖巴西鲷鱼苗情况表

催产批次 催产时间(月.日) 亲鱼数(尾) 产卵量(万粒) 受精率(%) 出苗量(万尾) 孵化率(%)
1 4.29 8 8 25 75.4 5 26.5
2 5.4 31 64 250 73.5 150 81.6
3 5.19 46 57 350 80.5 234 83.1
4 6.13 19 16 105 76.5 65 80.9
合计 104 145 730 76.5 454 68.0

  (2)巴西鲷鱼的胚胎发育:项目组成员对巴西鲷胚胎发育进行了连续观察和显微照相, 记 录各时序及其特征。成熟的巴西鲷卵为圆球形、呈黄褐色、属于漂浮性卵,无粘性,卵径为1.40~1.50mm,巴西鲷胚胎发育速度快,受精卵在水温26~27℃条件下,出膜时间为13h 35min。初步了解了巴西鲷在人工繁殖条件下胚胎发育的基本规律,并根据拍照的结果, 描绘出巴西鲷的胚胎发育时序图。详见附图及表2。               

表2        巴西鲷胚胎发育特征和速度(水温26~27℃)  

                                  经历时间
图序 名称
1 受精卵  1圆球形、卵质均匀分布。 0∶0  
2 1细胞期

原生质集中在卵球一极形成隆起的胚盘。  

0∶25分
3 2细胞期 胚盘经分裂为两个大小相等的细胞。 0∶34分  
4 4细胞期 分裂球再次经裂,分裂沟与第1次相垂直,4个细胞大小相等。 0∶42分  
5 8细胞期

有两个经裂面与第1次分裂面平行,8个细胞排列成两排,分裂 球的体积无明显差异,中间4个略小而稍高,颜色较深。

0∶51分  
6 16细胞期 两个经裂面与第2次分裂面平行,16个细胞死,此16个细胞体积上 稍有差异,内源物渐少。 1∶05分  
7 多细胞期 有4个经裂面与第3次分裂面平行,32个细胞成4行排列在同一平面 , 仍分经裂,但各分裂球分裂的速度不甚一致,大小不十分整齐的64个细胞,细胞继续分裂, 体积变小界线不清。 1∶28分
8 囊胚早期 由很多分裂球组成本胚层,高突在卵黄上。   1∶55分
9 囊胚晚期 细胞继续分裂,并开始产生下包作用,细胞界线完全模糊不清 ,胚层高度下降至卵径的1/6左右。 2∶23分  
10 原肠早期

胚层开始较明显的下包,胚盘类似帽状套在卵黄囊之上,下 包达卵径的1/4处。  

2∶27分
11 原肠中期* 原囊胚高度完全消失、卵黄内含物清晰,可见,下包达卵径 的3/5处,即原肠中期。 2∶58  
12 原肠后期 胚层下包超过卵黄囊的2/3,胚层包围了大部分卵黄,胚体雏形 开始形成胚盾伸长过动物极端,并于前端开始形成略为膨大的脑泡原基,胚体的中轴器官开 始分化形成。
13 神经胚期 胚层包围了绝大部分卵黄,仅植物极端露出卵黄栓。 4∶ 43  
14 胚孔封闭期 胚层完全包围卵黄,胚层合拢,胚孔封闭,胚体雏形形成。 5∶32分  
15 体节出现期 胚体稍有增长,在胚体中部偏前,开始形成肌节3-4节。 6 ∶08分  
16 脊索出现期 体节增至6-7节,头部出现眼泡原基,同时形成脑泡的分化 ,脑泡在 眼泡的正上方。体节增至11-12节,在眼泡原基内出现扁豆形的眼囊。体节增至14节,在 胚体的中轴上出现脊索,体节增至17节时脊索更明显。 7∶59分  
17 尾芽期

体节增至20-21节,尾芽从卵黄囊未端分化出来,可见一游离的 圆形尾泡,尾泡透明。

9∶04分  
18 晶体形成期 受精后571min,在胚体前端正方出现泡状听囊原基,同时 胚体 出现全身间歇性抽动,每分钟10次,随后抽动频率逐渐增加,受精后641min,体节增至25 26节抽动达60次/min,占胚全长2/5部 分的尾部与卵黄囊游离分开,尾部伸出鳍褶形成。受精后650min,头部、腹部下方斜角三角 形透明处出现心脏原基,有许多颗粒物质集中较密。受精后658min,眼囊内出现类似圆形无 色透明的眼泡晶体,体节增至30-31节。   10∶58分
19 心跳期 受精后673min,在听囊中椭圆形 的两端形成两个颜色较深,清 晰可见 的耳石,尾部抽动频率增至114次/min,而且抽动稳定。受精后697min,心脏产生微微搏动 ,频率为50-54次/min,在胚体的中躯部至尾部肌肉有明显的收缩作用,使得胚体和卵黄囊 在卵膜内整体扭动,体节为34节(见图19)。 11∶37  
20 出膜期

受精后713min,胚体可见心脏及卵黄腹部有无色的液体循环, 胚体扭动加剧,高达151次/min、心率加快到75-79次/min,受精后720min,在眼晶体外圈开 始出现黑色素, 首先呈较细的圆圈,黑色素较稀,随后黑圈渐渐变粗,黑色素较密,最后使整个眼弥散黑色 素。受精后752min,血黄素出现,可见黄色血球在循环,在头部的腹下与卵黄囊端上方之间 4对鳃弓可见,在卵黄囊上许多血管清晰可见,肠道较明显,肛门开口处有较明显外凸,全 身抽动剧烈,体节增至37-38节。 
  
受精后775min,胚体中后腹面的鳍褶出现断裂,形成肛门。眼后下面形成6色透明的三 角形鳃盖,透过鳃盖可观察到内部的鳃弓,此时体节为41-43节。  
受精后790min,胸鳍原基形成,类似月牙形,受精后803min,进入孵化期。体节增 至45- 47节,全身抽动频率达180次/min。心跳115次/min,头部接触卵膜,胚体在膜内狂窜。卵膜 弹 性及光泽明显下降,卵膜愈来愈薄,有利于胚体头部先出膜13∶23 带出卵黄囊及胚体,完成整体孵 化过程(见图20)。出膜仔鱼体全长为4.46mm。本阶段持续12min左右。

*计算受精率。

      3.讨论  
     
(1)巴西鲷从出膜至性成熟,在广西南宁需22个月时间。成熟个体一般在600g以上,雌 鱼比雄鱼重,巴西鲷怀卵量较大,每公斤的亲鱼怀卵18~25万粒。注射催产剂可诱导亲鱼 在产卵池自然产卵受精,卵漂浮性,吸水后平均卵径为2.28mm,最大外膜直径3.94mm。
      (2)在水温26~27℃条件下,巴西鲷孵化时数为815min(即13h35min)。相同水温条件下 ,同为脂鲤属的淡水白鲳孵化时数为21h58min〔1〕,巴西鲷孵化时数比淡水白鲳少8 h2 3min。在水温27℃条件时,草鱼、鲢鱼孵化时数分别为23∶00、28∶15〔2〕,都比 巴西鲷孵化时数大。鱼类胚胎发育速度主要受遗传因素和水温等环境因素的影响。在本次试 验中水温26~27℃,溶氧6.9mg/l,pH值8.2~8.6,流速0.23m/s,说明环境条件适宜〔 3〕,根据对巴西鲷鱼苗培育结果,已证明仔鱼的生长发育正常,所以巴西鲷该胚胎发育 速度反映其遗传特征。
    (3)本次试验孵化用水的pH值为8.2~8.6,此用水碱度偏高是否对巴西鲷胚胎发育有影响尚待研究。
     (4)作者观察到在本试验条件下的胚胎畸形,若在孵化温度为28℃以上时畸形率更高。笔者认为在生产中孵化巴西鲷温度应控制在28℃以下,最佳孵化温度为25~27℃。

参考文献

[1]张中英等淡水白鲳的生物学和人工繁殖研究淡水渔业,1991(4):3-6  
[2]刘建康主编中国淡水鱼养殖学北京:科学出版社1992  
[3]雷慧僧等池塘养鱼学北京:科学出版社1981

 


本页最后更新时间:2001年09月18日