EDTA二钠对培养单胞藻的影响

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EDTA二钠对培养单胞藻的影响

姚久祥韦嫔媛卢小花

（广西水产研究所南宁530021）

摘要本试验对添加不同浓度的EDTA二钠培养等鞭金藻、扁藻、绿色杷夫藻、小球藻，经过3d的培养后，得出结论：添加1～7mg/L EDTA二钠的单胞藻增量比值最高达2.24，最低比值也有1.61，对单胞藻生长有促进作用；添加8～9mg/L的单胞藻增量比值有所降低，对单胞藻生长有一定的抑制作用。

关键词EDTA二钠单胞藻促进抑制

在单胞藻的生长过程中，适量微量元素能促进单胞藻的生长繁殖。微量元素在适宜范围内，对单胞藻生长都有促进作用，但浓度过高会起抑制作用，甚至导致中毒。由于单胞藻的生长繁殖，导致藻液中的pH值上升，常常使一些微量元素产生沉淀和溶胶化，使微量元素难以在藻液中保持适宜的浓度。络合物EDTA二钠可以络合重金属离子，并且络合和释放是可逆的，加以一定量的络合物，可以防止微量元素生成沉淀，并释放一定数量的微量元素离子，使微量元素保持在适宜的范围内。
　

1材料与方法

1.1材料

（1）试验用的单胞藻来自湛江海洋大学饵料室，分别为等鞭金藻、扁藻、绿色杷夫藻和小球藻。试验用的药品全部为分析纯。试验海水取自防城海区的天然海水，经砂滤、煮沸消毒后冷却待用。海水比重1.020，pH值调至7.6。

（2）基础培养液的共同成分为：硝酸钠60mg/L；磷酸二氢钾5mg/L；柠檬酸铁0.5mg/L；硅酸钠5mg/L；维生素B₁ 0.2mg/L；维生素B₁₂ 0.002mg/L；碳酸氢钠50mg/L。

1.2方法

（1）试验参照有关文献，第一次试验EDTA二钠水平设为2mg/L、4mg/L、6mg/L、8mg/L；第二次试验EDTA二钠水平设为3mg/L、5mg/L、7mg/L、9mg/L，每个水平有1#、2#、3#、4#共4个平行试验，取其平均值。

（2）培养用的容器为1000ml烧瓶，烧瓶经煮沸消毒冷却后待用，瓶口用蒸汽消毒纸扎口。藻液按1∶2的比例接种。接种后藻液浓度为10～85万个/ml。试验皆在室温下进行，温度为26℃～30℃，光照强度为1000Lx～7000Lx，培养时间为3d。每天充分摇瓶4次，并随机交换位置，以减少光照误差。

（3）用血球计数板计数各单胞藻浓度，每个藻样计数3次取其平均值，设对照组比值为1.0。增量比值=试验平均增加量/对照瓶平均增加量。
　

2试验结果与分析

表1 等鞭金藻加EDTA二钠培养结果

EDTA浓度 (mg/L)	初始密度 (万个/mL)	试验末各瓶密度(万个/mL)				平均密度 (万个/mL)	平均增加量 (万个/ 毫升)	增量比值
EDTA浓度 (mg/L)	初始密度 (万个/mL)	1#	2#	3#	4#	平均密度 (万个/mL)	平均增加量 (万个/ 毫升)	增量比值
0	50	260	253	252	259	256	206	1.0
2	50	415	405	430	418	417	367	1.78
4	50	518	495	523	502	512	462	2.24
6	50	518	490	478	511	499	449	2.18
8	50	201	208	221	234	216	196	0.95

（1）等鞭金

接种的初始密度是50万个/mL，EDTA二钠水平设为2mg/L、4mg/L、6mg/L、8mg/L。经过3d培养后，实验结果为：加2～6mg/L浓度的EDTA二钠试验组，其藻细胞密度比对照组明显增高，增量比值为1.78～2.24，都比对照组高，而8mg/L的浓度试验组增量比值为0.95，比对照组要低。
　

表2 扁藻加EDTA二钠培养结果

EDTA浓度 (mg/L)	初始密度 (万个/mL)	试验末各瓶密度(万个/mL)				平均密度 (万个/mL)	平均增加量 (万个/mL)	增量比值
EDTA浓度 (mg/L)	初始密度 (万个/mL)	1#	2#	3#	4#	平均密度 (万个/mL)	平均增加量 (万个/mL)	增量比值
0	10	46	51	69	66	58	48	1.0
2	10	94	91	112	119	104	94	1.95
4	10	123	101	107	119	115	105	2.18
6	10	110	106	115	117	112	102	2.13
8	10	43	67	61	49	55	45	0.93

（2）扁藻接种密度是10万个/mL，水平EDTA二钠设有2mg/L、4mg/L、6mg/L、8mg/L。经过3d培养后，实验结果是加2～6mg/L浓度EDTA二钠试验组的藻细胞密度增加较高，其增量比值为1.95～2.18；而8mg/L的浓度试验组增量比值下降为0.93。
　

表3 绿色杷夫藻加EDTA二钠培养结果

EDTA浓度 (mg/L)	初始密度 (万个/mL)	试验末各瓶密度(万个/mL)				平均密度 (万个/mL)	平均增加量 (万个/ 毫升)	增量比值
EDTA浓度 (mg/L)	初始密度 (万个/mL)	1#	2#	3#	4#	平均密度 (万个/mL)	平均增加量 (万个/ 毫升)	增量比值
0	60	331	322	301	302	314	254	1.0
3	60	572	580	551	559	563	503	1.98
5	60	578	598	608	620	601	541	2.13
7	60	460	472	473	471	469	409	1.61
9	60	297	283	280	284	286	224	0.88

（3）绿色杷夫藻接种密度是60万个/mL，水平EDTA二钠设为3mg/L、5mg/L、7mg/L、9mg/L。经过3d培养后，试验结果为3～7mg/L浓度的EDTA二钠试验组，其藻细胞密度增加较大，增量比值在1.61～2.13之间，都比对照组明显提高，而9mg/L浓度组的增量比值为0.88，比对照组明显降低。

（4）小球藻接种的密度是85万个/mL，水平EDTA二钠设为3mg/L、5mg/L、7mg/L、9mg/L。经过3d培养后，实验结果为：加3～7mg/L浓度EDTA二钠试验组的藻细胞密度比对照组增殖明显，增量比值达1.96～2.06，而9mg/L浓度的试验组增量比值下降为0.90。
　

表4 小球藻加EDTA二钠培养结果

EDTA浓度 (mg/L)	初始密度 (万个/mL)	试验末各瓶密度(万个/mL)				平均密度 (万个/mL)	平均增加量 (万个/mL)	增量比值
EDTA浓度 (mg/L)	初始密度 (万个/mL)	1#	2#	3#	4#	平均密度 (万个/mL)	平均增加量 (万个/mL)	增量比值
0	85	938	949	954	951	948	863	1.0
3	85	1778	1771	1778	1767	1776	1691	1.96
5	85	1867	1869	1858	1858	1863	1778	2.06
7	85	1618	1615	1620	1631	1621	1536	1.78
9	85	854	870	864	860	862	777	0.90

3讨论

从以上试验结果可以看出，添加适宜浓度的EDTA二钠对等鞭金藻、扁藻、绿色杷夫藻、小球藻的生长繁殖有良好的促进作用。其中添加2～7mg/L浓度的EDTA二钠培养的单胞藻，其细胞浓度均超过对照组，增殖效果也很明显，增量比值在1.61～2.24之间；而添加8～9mg/L浓度的EDTA二钠培养的单胞藻都比对照组要差。另外，相同浓度的EDTA二钠对不同生长速度的藻类，其增殖效果也不尽相同。通过以上试验，可以认为EDTA二钠在培养单胞藻中，添加的适宜浓度在2～7mg/L之间，这与刘振华等^［2］所做的关于角毛藻的试验中适宜浓度为3～6mg/L大致相同，在此之外，过量的EDTA二钠就会抑制单胞藻的生长繁殖，我们在实际生产中考虑到生产成本以尽量低的用量为佳。此外，还要根据各海区水质的实际情况而定，不能一概而论。

参考文献

［1］李庆彪.生物饵料培养技术.北京：中国农业出版社，1988

［2］刘振华.EDTA二钠对培养牟氏角毛藻的影响.科学养鱼，2004（1）

最后更新日期：2007年04月13日

主办单位: 广西水产研究所、广西水产学会