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广西水产科技 2003年第1期(总第106期) 三角鲤人工繁殖技术研究 杨家坚 梁军能
卢智发 (广西水产研究所
南宁 530021) 提 要 本研究设计实施了生态刺激诱导产卵、敏感催产药物筛选、催产药物剂量控制、催产技术重复验证等一系列试验。受试亲鱼120组,顺产75组,顺产率62.5%;收集鱼卵77.1%万粒,获受精卵57.3万粒,平均受精率74.3%;孵出鱼苗33.6万尾,平均孵化率58.6%。建立了一套稳定可靠、实用性强的三角鲤人工繁殖技术。 关键词
三角鲤 繁殖 三角鲤(Cyprinus multitaeniata Pellegrin et
Chevey),俗称江鲫、黄板鲫。主要分布于我国的珠江水系和沅江水系,以及越南的红河、黑河,巴比湖等水域,尤以我区境内的红水河、郁江、柳江和左、右等江段资源量最为丰富。其肉嫩味美、为鱼中上品,是发展前景十分看好的养殖新对象。但长期以来,对三角鲤的开发利用仅限于江河捕捞,至今未有公开的人工繁殖研究报道。1999年,我们开始着手进行三角鲤野生鱼种驯化、亲鱼培育、人工催产等立项前期试验工作,初步掌握了三角鲤在人工控制条件下的繁殖生物学特性;2002年正式立项,并得到了广西水产畜牧局“苗种攻关项目”专项经费资助,同年加大了研究攻关力度,终于取得了三角鲤人工繁殖的成功。兹将项目的部分试验内容整理成文,以资参考。 1 材料方法 1.1 亲鱼 试验亲鱼是本课题组1999年收购的野生三角鲤鱼种,经池塘强化培育3年而育成的成熟亲鱼,共120组(每1尾雌鱼配2尾雄鱼为1组,下同)。其选择的标准为:雌鱼体重400g以上,腹部卵巢轮廓明显、手感柔软有弹性,泄殖孔微红,孔周组织松驰;雄鱼体重300g以上,轻压腹部有奶酪状精液流出,精液遇水即散。 1.2 产卵与孵化设施 圆形产卵池两口(面积30m2、池深2m);水泵2台;配置人工鱼巢1批(以根系发达的水葫芦作鱼巢,每尾雌鱼约配备5株)。位于大棚内的水泥池12口(规格为2.25m×1.75m×0.80m),面积约4m2,长方形;有独立完善的供排水系统;每池配备散气石2个。 1.3 试验药品、器具 1.3.1 药品:鲤鱼脑垂体(PG)、促黄体激素释放激素(LHRH-A2)、促性腺激素释放激素(HCG)、生理盐水(0.7%)、高锰酸钾溶液(20ppm)、酒精(75%)等药品和试剂1批。 1.3.2
器具:1ml针筒5支,2ml针筒2支,5号针头和7号针头各2盒;研钵、量筒1~2个;药棉、毛巾、亲鱼夹、抄网等器具1批。 1.4
试验方法 试验分两阶段进行,第一阶段(试验Ⅰ~Ⅲ)为基础试验阶段,旨在研究掌握一系列基本的繁殖技术参数,初步形成一套三角鲤人工繁殖技术雏形。第二阶段(试验Ⅳ、Ⅴ)为繁殖技术的重复试验,即在第一阶段试验的工作基础上,在不同的时间和试验条件下,验证技术的稳定性和可靠性。 1.4.1
生态刺激诱导自然产卵(Ⅰ) 试验时间为3月9日至19日,试验水温19.1℃~21.8℃,受试亲鱼10组。在圆形产卵池中,设置人工鱼巢,并提供一定的水流条件、制造水位差反复刺激亲鱼3~4日,诱导亲鱼自然交配产卵。 1.4.2
敏感催产药物筛选(Ⅱ) 本试验于3月22~27日进行,催产水温为20.0℃~22.3℃;受试亲鱼24组,分别在4方形水泥池中催产,每池6组。其中3个池的亲鱼采用几种常规催产药物的较高剂量进行一针法人工催产,各种药物的换算效价相当,分别为PG6mg/kg、LHRH-A230μg/kg、HCG1200IU/kg,另设1个自然产卵池作为对照。 1.4.3
敏感催产药物剂量控制(Ⅲ) 试验时间4月1~7日,催产水温为21.9℃~23.7℃;受试亲鱼30组,分别在3个水泥池中催产,每池10组。根据试验Ⅱ的结果,选用三角鲤亲鱼较敏感的药物、分3个不同剂量梯度以2针法进行催产。雌鱼第1针注射总剂量的1/3,第2针注射余量,针距10h;雄鱼则在雌鱼注射第2针时方进行注射,剂量为雌鱼的1/2。 1.4.4
催产技术验证(Ⅳ) 试验时间为4月14~20日,催产水温22.4℃~24.7℃,受试亲鱼30组,产卵池为1口30m2的圆形水泥池;对试验Ⅲ中最好的技术方法进行技术验证。 1.4.5
催产技术重复验证(Ⅴ) 本试验于5月15~20日进行,催产水温为26.6℃~27.8℃,受试亲鱼26组,试验方法同试验Ⅳ。 1.4.6 孵化 提前将鱼种培育池彻底消毒,孵化用水(池塘水)经80目筛网过滤入池,水深80~100cm;产卵后,将粘附有受精卵的鱼巢移入孵化池,以静水+充氧方式进行孵化;孵化期间,每天以药物泼洒消毒鱼巢,预防水霉滋生,直至鱼苗出膜。 1.4.7
相关数据及其处理 相关数据:催产数(尾)、催产药物及剂量、催产数(尾)、产卵量(万粒)、受精卵(万粒)、孵出苗数(万尾)、催产率、受精率及孵化率。 数据处理:亲鱼产卵后即计算催产率;并随机抽取鱼卵样本(600粒以上),用孵化箱置于相同的条件下,孵化12h后统计样本受精率;孵化完毕计算鱼苗数、样本孵化率;受精卵及产卵量则以鱼苗数和样本受精率估算。 2
结果与分析 2002年先后进行5批次三角鲤繁殖试验,受试亲鱼共120组,产卵75组,催产率62.5%;收集鱼卵77.1万粒,其中受精卵57.3万粒,平均受精率74.3%;孵出鱼苗33.6万尾,平均孵化率58.6%。试验结果详见附表。 2.1
人工营造环境条件诱导亲鱼自然繁殖 由试验结果看出,在19.1℃~21.8℃的水温条件下,人工设置产卵环境结合一定的水流刺激,可有效诱导亲鱼自然交配产卵。受试亲鱼10组,其中4组产卵,效应时间(从亲鱼入池至开始发情交配)4d,产卵活动持续3d,催产率为40%;共获鱼卵2.0万粒,受精卵1.5万粒,受精率75.0%;孵化时间约3d,孵出鱼苗9000尾,孵化率60.0%;由此可见,该诱导繁殖方
法虽然奏效,但效应时间长、交配产卵同步性差、催产率较低。 2.2
敏感催产药物筛选试验 本试验分别在4个长方形水泥池(规格如前述)中进行,每池受试亲鱼6组。共获鱼卵12.5万粒,受精卵8.8万粒,受精率70.0%;孵化鱼苗4.5万尾,孵化率为51.3%。其中1#池亲鱼使用PG催产,产卵5组,2#池亲鱼使用LHRH-A2催产,产卵4组,催产率分别为83.3%和66.7%,效应时间均为14h;而使用HCG的3#池亲鱼和作为空白对照的4#池亲鱼无产卵行为。结果表明,PG和LHRH-A2两种药物对三角鲤亲鱼较敏感。 附表
2002年三角鲤人工繁殖试验情况一览表 内容
日期
试验
试验
产卵
催产
产卵
受精
受精
孵化
孵化效应 (月·日)
水温亲鱼
药物剂量
亲鱼
率
量
卵
率
鱼苗
率 (℃) (组)
(尾)
(%)(万粒) (万粒) (%) (万尾)(%)时间 自然 3.9
19.1 产卵
~
~
10
4
40 2.0
1.5 75.0
0.9 60.0
4d (Ⅰ) 3.1921.8
催产
6 PG6mg/kg
5 83.3 药物 3.22 20.0 6 LHRH-A230ug/kg 4 66.7
12.5 8.8 70.0
4.5 51.3
14h 筛选 ~~
6 HCG1200IU/kg 0
0 (Ⅱ) 3.2722.3 6
空白对照
0 0
催产
10 PG+LHRHA2
0 0 药物 4.1 21.9
(2mg+5ug)/kg 剂量 ~
~
10 PG+LHRHA2
8 80
20.8 15.4
74.0 8.7
56.4 10h~12h 控制 4.7 23.7
(4mg+10ug)kg (Ⅲ)
10 PG+LHRHA2
8 80 (5mg+15ug)/kg
技术4.14 22.4 验证 ~ ~
30 PG+LHRHA2
25 83.3
22.8 17.3
75.7 10.5
60.8 11h (4mg+10ug)/kg (Ⅳ)4.2024.7
技术 5.15
26.6 重复 ~
~ 26 PG+LHRHA2 21
80.8 19.0
14.3 75.1
9.0 63.1
7h~8h 验证 5.20
27.8 (4mg+10ug)/kg (Ⅴ)
合计
120
75 62.5
77.1 57.3
74.3 33.6
58.6
2.3 敏感催产药物剂量控制 本试验采用三角鲤亲鱼较敏感的PG和LHRHA2两种药物混合、分3个剂量梯度以2针法
进行胸腔注射催产,以确定敏感催产药物的适宜用量。结果:1#池亲鱼催产剂量为(PG2mg
+L HRHA25ug)/kg,没有获产。2#、3#池亲鱼的催产剂量分别为(PG4mg+LHRHA210
ug)/kg和(PG5mg+LHRHA215ug)/kg,各有8尾亲鱼产卵,产卵率各为80%;共产卵20.8万粒,受精卵15.4万粒,受精率74.0%;孵化鱼苗8.7万尾,孵化率为56.4%;效应时间10~12h。结果表明,在21.9℃~23.7℃的水温条件下,两种敏感药物混合使用的适宜剂量为(PG4mg+L
HRHA210ug)/kg。 2.4 催产技术验证 本试验采用试验Ⅲ中的最佳技术方法进行,以验证该技术在不同时间、环境、温度及不
同亲鱼条件下的稳定性。受试亲鱼30组,产卵25组,催产率83.3%,效应时间约9~11h;获
得鱼卵22.8万粒,受精卵17.3万粒,受精率75.7%;孵化鱼苗10.5万尾,孵化率60.8%
。结果表明,除效应时间随着水温的升高有所缩短外,其它技术性能指标均较为稳定。 2.5 催产技术重复验证 本试验的技术方法同试验Ⅳ,受试亲鱼26组,催产水温为26.6℃~27.8℃。产卵21组,催产率80.8%,效应时间约7~8h;产卵19.0万粒,受精卵14.3万粒,受精率为75.1%;孵化鱼苗9.0万尾,孵化率63.1%。重复验证结果进一步表明,我们所掌握和使用的一套三角鲤人工繁殖技术,效果良好,是经得起重复的。 3、结论 本研究通过生态刺激诱导产卵、敏感催产药物筛选、药物剂量控制、技术重复验证等一系列试验,初步确定了亲鱼选择标准、自然产卵条件、敏感催产药物及其用法用量等一系列重要技术参数,建立了一套稳定可靠、高效实用的三角鲤人工繁殖技术。研究归纳出以下几点重要结论: (1)三角鲤在适宜的条件下可自然产卵繁殖。适宜的条件包括:亲鱼必须处于其繁殖季节,性腺发育成熟;水温持续1周在19℃以上;水环境中具备水葫芦等卵子附着物;有一定的水流条件及水位差变化持续刺激。 (2)亲鱼通过生态条件的诱导刺激虽然可以自然繁殖,但产卵同步性差,待产时间长,催产率低,产卵量少。 (3)使用外源性激素进行人工催产,能促使亲鱼同步、批量产卵繁殖,效应时间短(7~14h)、产卵率高。这对进行三角鲤早繁苗生产,避开恶劣的气候、温度条件具有重要意义。 (4)几种常用催产药物对三角鲤亲鱼的敏感度依次为PG>LHRHA2>HCG;使用HCG1200IU/kg(20.0℃~22.3℃)及(PG2mg+LHRHA25ug)/kg(21.9℃~23.7℃)的两种药物剂量催产无效;使用PG和LHRHA2两种药物混合、剂量为(PG4mg+LHRHA210ug)/kg,以2针法进行人工催产,效果稳定、可靠。 |
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